|
ЖУРНАЛ ПРИКЛАДНОЙ СПЕКТРОСКОПИИ
|
ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ СВОЙСТВА ПИРОНОВОГО КРАСНОГО — НОВОГО
МОЛЕКУЛЯРНОГО ЗОНДА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ БЕЛКОВ
В. Б. Гаврилова*, С. В. Конева, И. И. Калошаб
УДК 577.366:577.112.824
а Институт фотобиологии НАН Беларуси,
220072, Минск, ул. Ф. Скорины, 27
б Институт молекулярной и атомной физики НАН Беларуси,
(Поступила 13 февраля 1998)
Исследована зависимость люминесценции нового анионного красителя пиронового
красного (ПК) от полярности среды. При переходе из водной в неполярную
фазу у ПК происходит коротковолновый сдвиг максимума испускания флуоресценции
с 675 до 650 нм и увеличение квантового выхода флуоресценции с 0.03 до
0.54—0.7. В комплексе с сывороточным альбумином человека максимумы возбуждения
и испускания флуоресценции ПК соответствуют 525 и 625 нм, а квантовый выход
флуоресценции равен 0.8. При сравнении люминесцентных свойств ПК и известных
зондов АНС и К35 в воде и комплексе с альбумином показано, что ПК обладает
максимальной абсолютной чувствительностью, но уступает АНС по параметру
усиления флуоресценции при связывании с белком. Предложен удобный
критерий чувствительности зон-дов к связыванию с белками, определяемый
по отношению интенсивностей флуоресценции зон-да в связанном с белком и
свободном состояниях АF = Fb/Ff.
По величине АF (35) зонд ПК занима-ет
промежуточное положение между зондом К35 с низким АF (18) и
АНС с высоким АF (105).
Ключевые слова: флуоресцентный зонд, флуоресцентный анализ,
альбумин, белок.